性能卓越的ProminenceUFLC,開創了超快速液相色譜分析新天地。真正實現快速化與高分離性能兼備。
島津公司徹底解析阻礙實現快速化的原因,實現了不依賴于高壓的快速化和高分離分析,更為重要的是成功地同時具備了以往快速LC未能達到的高與擴展性。
ProminenceUFLC徹底追求“速度”、“重現性”以及“擴展性”的理由在于——此三要素正是HPLC的起始點,同時也是超快速LC的新標準。
技術參數:
Prominence 支持快速分離
Prominence使用標準部件,可以同時滿足研究人員傳統分析和高速分析的需求,也可以支持高達85℃的操作溫度,從而使更低壓力下的快速分析成為可能,同時該儀器體現出的分析性能和通量水平即使是在更昂貴的儀器配置上也不多見。
Prominence UFLC通過以下特性支持快速分析:
1、小柱管和小體積的流通池降低了柱外峰展寬效應。
2、使用2.2μm顆粒大小的色譜柱Shim-pack XR-ODS。
Shim-pack XR-ODS是考慮上述填料細微化的問題,從分離效率和壓力的關系中巧妙找到平衡,可提高或維持分離效果的同時縮短分析時間的新一代快速分析用色譜柱。
Chromatographic conditions; column: described above, mobile phase: water/acetonitrile (3/7,v/v), flow rate: described above, temperature: 40℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(XR-ODS), 10μL(VP-ODS).
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
3、 Prominence SIL-20A自動進樣器實現10秒鐘10μl的超快速進樣。
Chromatographic conditions; column: Shim-pack XR-ODS(3mm i.d.×30mm, 2.2μm), mobile phase: water/acetonitrile(4/6 to 2/8 in 0.4 min, convex gradient), flow rate: 3mL/min, temperature: 80℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(each 800 nm ol),.0.1 min delayed injection.
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
4、 支持高達85℃的高溫分析。
溫度與快速分析:隨著柱溫升高,理論塔板數增加,柱效增高,柱壓降低。
Chromatographic conditions;
mobile phase: water/acetonitrile (3/7, v/v),
detection: absorbance at 245 nm.
Peaks: 1: 苯乙酮 2: 苯丙酮 3: 苯丁酮 4: 苯戊酮 5: 苯己酮 6: 苯庚酮 7: 苯辛酮
溫度對化合物的影響:高溫分析在降低柱壓方面很有效,但是高溫引起色譜柱的劣化、導致樣品分解等不足在應用時需要引起注意。高溫分析只是作為快速分析的輔助手段加以運用。
5、具備高采樣頻率的檢測器,可以實現快速的數據獲取而不會丟失信息。
6、專門的色譜方法轉換軟件,使常規色譜條件轉換為UFLC條件簡單易行,保證分析方法的通用性。
快速分析的重現性
在快速分離中要取得成分保留時間的重現性要比常規分析中更加困難。保留時間的重現性(RSD)和時間的平方根成反比增大,所以需要比常規分析更為嚴格的送液性能。Prominence UFLC可以保證送液分辨率 3nL/min的微沖程送液、梯度送液時控制響應為0.1秒的卓越送液能力,可以發揮極為優越的保留時間重現性。
什么是高通量
快速液相色譜的目標就是高通量,也就是說每天或每小時有更多的樣品被分析。為了實現高通量,不僅要縮短單個樣品分析時間,而且整個循環進樣和分析時間也必須優化。追求快速化的本意不僅是縮短分析時間,而且是縮短分析周期。Prominence UFLC的樣品注入速度為10秒,使得分析周期得以大為縮短。
應用實例
PTC衍生氨基酸的UFLC分析
氨基酸分析有兩種檢測方法,其一是使用離子交換色譜柱分離之后,進行衍生化再檢測的柱后衍生化法,另一種是先衍生化后,使用反相色譜柱進行分離的柱前衍生法。從快速分析的角度考慮,柱前衍生化法行之有效。在此,使用Shim-pack XR-0DS以更短的時間進行了氨基酸分析。
使用異硫氰酸苯酯進行衍生化。柱后衍生法時需要1小時,柱前衍生化法使用常規色譜柱時需要25分鐘的分析可縮短至4分鐘。
色素的UFLC分析
添加在食品中的色素有合成化合物和天然化合物,這些色素水溶性高,多用HPLC進行分析。但在多個色素組合使時,同時分析所需時間長。在此表示使用Shim-pack XR-ODS超快速LC進行的色素同時分析例。12種成分色素的同時分析的結果如下張色譜圖。使用常規LC所需分析時間為50分鐘,而使用超快速LC,約6分鐘便結了分析。
多環芳烴(PAHs)的UFLC分析
PAHs是一種判斷車輛等廢氣污染大氣環境程度的化學物質。PAHs具有強致癌性,所以這些物質的大氣監測是重要的測定項目。PAHs顯示強熒光,可以利用熒光檢測器進行高靈敏分析。
對于此10種PAHs的分析,在不損失分離狀態下,相對于常規LC (分析時間50分鐘) ,UFLC實現了10倍速度的快速化分析(分析時間5分鐘)。
主要特點:
綜合當前快速化的基本要求,島津開發了新型號的Prominence UFLC超快速液相色譜儀,使用標準部件,可以同時滿足用戶傳統常規分析和快速化分析的需求,也可支持高達85℃的操作溫度,從而使更低壓力下的快速分析成為可能,同時該儀器體現出的性能和高通量即使是在更昂貴的儀器配置上也不多見。
Prominence UFLC通過以下特性支持快速分析:
1、 小管路和小體積的流通池降低了色譜柱外峰展寬效應。
2、 使用2.2µm顆粒大小的色譜柱Shim-pack XR-ODS。
Shim-pack XR-ODS是考慮上述填料細微化的問題,從分離效率和壓力的關系中巧妙找到平衡,可提高或維持分離效果的同時縮短分析時間的新一代快速分析用色譜柱。
2.1 小理論塔板高度是常用色譜柱(5µm)的1/2以下
2.2 流動相流量是常用色譜柱(5µm)的2倍以上
2.3 理論塔板數和常用色譜柱(5µm, 柱長150mm)同等或以上
2.4 柱壓在流速下幾乎所有分析條件中都是30MPa以下
2.5 色譜柱的特性和Shim-pack VP-ODS相同
3、 Prominence SIL-20A自動進樣器實現10秒鐘10µL的超快速進樣。
4、 Prominence SIL-20A 自動進樣器交叉污染僅0.005%
5、 支持高達85℃的高溫分析。
溫度與快速分析:隨著柱溫升高,理論塔板數增加,柱效增加,柱壓降低。
但是高溫也會引起很多的相關問題,例如色譜柱的劣化、導致對溫度敏感的樣品的分解、溫度差異帶來的色譜峰的展寬現象、流動相氣化帶來檢測的不穩定等等,同時在硬件的實現方面有著很多的問題,在應用時應引起注意,所以島津建議高溫分析只是作為快速分析的輔助手段加以運用。
6、 具備高采樣頻率的檢測器,可以實現快速的數據獲取而不會丟失信息。
總的來說,快速液相色譜的目標就是高通量,也就是說每天或每小時有更多的樣品被分析。真正的快速化是整個分析周期的縮短,為了實現高通量,不僅要縮短單個樣品分析時間,而且整個循環進樣和分析時間也必須優化。為了實現縮短分析周期,如下兩點需注意:
1、 自動進樣器的樣品注入速度。
2、 不依賴于清洗,降低交叉污染。
Prominence UFLC自動進樣器的樣品注入速度為10秒,對進樣針實施了特殊處理,減少針接觸面等方法降低了樣品的交叉污染,從而使得分析周期大幅度縮短,實現真正的超快速高通量分析。








